各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下:
如羊抗鼠IgG-HRP的效价测定
抗原包板:15μg/ml小鼠IgG-pH9.6·CB液
↓
37℃包被60min或4℃过夜
PBST洗板3次,5min/次
加入倍比稀释的HRP标记抗体
37℃ 30min
PBST洗板5min/次×3
底物液0.1ml/孔 37℃ 5~10min
终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔
OD450nm测定OD值
阳性OD450nm值,比对照值大3倍孔,为判断效价稀释度。